菌落計數(shù)方法的具體操作步驟及注意事項

      現(xiàn)今，對菌落的研究越來越多，研究菌落的方法也越來越多，下面我們來具體說說菌落計數(shù)方法。菌落計數(shù)方法是將待測樣品適當(dāng)稀釋后，取一定量的稀釋液涂布到平板上，每個單細(xì)胞生長繁殖而形成肉眼可見的菌落，即一個單菌落代表原樣品中的一個單細(xì)胞，即菌落形成單位（colony-forming units，CUF）。該方法是根據(jù)每個活的細(xì)菌能長出一個菌落的原理設(shè)計的，菌液中的死亡細(xì)菌或無繁殖能力的細(xì)菌不包括在內(nèi)。

菌落計數(shù)方法操作方法如下：
1、取一定量（如100μl）的菌懸液，進行10×倍梯度系列稀釋；
2、取一定量（如100μl）稀釋液均勻涂布于平板培養(yǎng)基，每個稀釋度至少涂3個平板；
3、根據(jù)待計數(shù)細(xì)菌的培養(yǎng)特性，將涂好的平板放置于適當(dāng)?shù)臈l件下進行培養(yǎng)；
4、待平板上長出菌落后，選取稀釋度合適的平板（通常菌落數(shù)為數(shù)十至數(shù)百個之間），數(shù)平板上的菌落數(shù)，根據(jù)稀釋度和涂平板的液體量，換算出原始菌液中的活菌數(shù)。通常單位是CUF/ml，即每ml原始菌液中有多少個活菌數(shù)。
菌落計數(shù)方法的注意事項：
1、一般選擇每個平板上長有30-300個菌落的稀釋度計算每毫升的含菌量較為合適。
2、同一稀釋度的三個重復(fù)對照的菌落數(shù)不應(yīng)相差很大，否則表示試驗不。
3、為了減少誤差，同一稀釋度重復(fù)對照平板建議不要少于3個。
4、計數(shù)稀釋度平板的菌落數(shù)與上下相鄰稀釋度平板的菌落數(shù)基本呈10倍量關(guān)系，否則表示稀釋度不準(zhǔn)確。
以上就是菌落計數(shù)方法的操作步驟及注意事項，希望對大家有所幫助。