浮游植物鑒定中葉綠素a的常規測定方法

        在浮游植物鑒定中，測出的葉綠素a的含量是表征浮游植物生物量的重要指標之一。通過測定浮游植物葉綠素，可掌握水體初級生產力情況，反映水體富營化程度。通常對淡水中葉綠素a的測定方法是采用《水和廢水監測分析方法（第四版）》，即下面所用的規范方法。該方法實驗提取過程操作略顯繁瑣，樣品在分析過程中多次轉移，易造成樣品的缺失，影響浮游植物鑒定結果。在不影響丙酮萃取分光光度法原理的前提下，利用丙酮加熱以提高萃取能力，并對若干個湖泊、湖庫、河流水進行了對比實驗。
　　在改進的方法中，將步驟2的樣品提取，從“取出干燥后的濾膜放入研缽，加入少量碳酸鎂粉末和2~3mL90%丙酮，充分研磨提取葉綠素a。用離心機4000r/min離心20min。將上清液轉入10mL比色管，用90%丙酮定容為10mL，搖勻。”改成“將干燥后的濾膜放入10mL具塞比色管中，加入少量的碳酸鎂粉末，再加入90%丙酮10mL，旋緊管塞，于50℃恒溫水浴鍋中萃取5min。充分搖勻后，放入4℃冰箱在黑暗中浸漬提取5h。”
　　通過兩個方法得出的結論可看出，規范法操作步驟略顯繁瑣，在樣品的研磨過程中，本來含量就低的樣品極易損失，不易收集。丙酮易揮發的特性，又使得研磨不能持久太久，造成規范法的測定結果偏低。改進法利用丙酮加熱提升了丙酮的萃取能力，延長浸漬時間，促進藻類細胞破裂，使更多的葉綠素a從細胞中釋放出來。在整個過程中，提取物始終保持在密閉的比色管中，保持了定容的體積，確保了葉綠素a濃度的可靠性。實驗證明，采用丙酮加熱、延長提取時間的方法可以提高對葉綠素a的提取，簡便易操作的特點更適用于大批樣品的數據監測。