紅細(xì)胞微核計(jì)數(shù)的正確操作和注意事項(xiàng)

　　紅細(xì)胞微核計(jì)數(shù)系統(tǒng)專為遺傳毒理大數(shù)據(jù)設(shè)計(jì)，適用Giemsa染色的哺乳動(dòng)物骨髓或外周血紅細(xì)胞微核試驗(yàn)。通過對(duì)嗜多染紅細(xì)胞(PCE)的智能學(xué)習(xí)，采用隨機(jī)共振技術(shù)，幾十秒即可從上百?gòu)埢煊懈黝惣?xì)胞的顯微影像中抓取2000個(gè)PCE細(xì)胞并識(shí)別微核，自動(dòng)計(jì)算含微核細(xì)胞率。

　　紅細(xì)胞微核計(jì)數(shù)操作和注意事項(xiàng)

　　1.清潔：應(yīng)保證計(jì)數(shù)板和蓋玻片清潔。操作時(shí)，勿接觸計(jì)數(shù)板表面，以防污染。使用后，依次用95%乙醇、蒸餾水棉球、清潔綢布擦凈。

　　2.充池：需一次完成充池，如充池過少、過多或有氣泡、繼續(xù)充液，應(yīng)重新操作，充池后不能移動(dòng)蓋玻片。紅細(xì)胞在計(jì)數(shù)池中若分布不均，每個(gè)中方格間相差超過20個(gè)應(yīng)重新充池，兩次紅細(xì)胞計(jì)數(shù)相差不得超過5%.

　　3.計(jì)數(shù)板：改良牛鮑計(jì)數(shù)板每年要鑒定1次，以免影響計(jì)數(shù)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

　　4.白細(xì)胞影響：通常白細(xì)胞總數(shù)較少，僅相當(dāng)于紅細(xì)胞的1/500～1/1000，對(duì)結(jié)果影響很小，可以忽略不計(jì)。但白細(xì)胞過高者（WBC>100×109/L），紅細(xì)胞計(jì)數(shù)結(jié)果應(yīng)進(jìn)行校正。方法有兩種：一是直接將患者紅細(xì)胞數(shù)減去白細(xì)胞數(shù)，二是在高倍鏡下觀察勿將白細(xì)胞計(jì)入，白細(xì)胞體積常比紅細(xì)胞略大，中央無凹陷，細(xì)胞核隱約可見，無黃綠色折光。

　　5.紅細(xì)胞稀釋液：傳統(tǒng)稀釋液（Hayem液）由NaCl（氯化鈉，調(diào)節(jié)滲透壓）、Na2S04.10H2O（結(jié)晶硫酸鈉，提高比密防止細(xì)胞粘連）、HgCl2.和蒸餾水組成。枸櫞酸鈉稀釋液由枸櫞酸鈉（抗凝和維持滲透壓）、甲醛（防腐和固定紅細(xì)胞）、氯化鈉（調(diào)節(jié)滲透壓）和蒸餾水組成。普通生理鹽水或加1%甲醛生理鹽水。
 

　　紅細(xì)胞微核計(jì)數(shù)微核試驗(yàn)是檢測(cè)染色體或有絲分裂器損傷的一種遺傳毒性試驗(yàn)方法。無著絲粒的染色體片段或因紡錘體受損而丟失的整個(gè)染色體，在細(xì)胞分裂后期仍留在子細(xì)胞的胞質(zhì)內(nèi)成為微核。較常用的是嚙齒類動(dòng)物骨髓嗜多染紅細(xì)胞(PCE)微核試驗(yàn)。以受試物處理嚙齒類動(dòng)物，然后處死，取骨髓，制片、固定、染色，于顯微鏡下計(jì)數(shù)PCE中的微核。