不同培養基的體積對抑菌圈的影響大

       不同體積培養基對抑菌圈大小有一定影響，抑菌圈會隨培養基體積的增加而變小，培養基體積15 mL時為佳值。試驗人員應注重量化培養基的量以減少試驗誤差。為了判斷這一結論的準確性，我們可以通過一下的試驗來進行鑒定。本試驗正是通過制備不同體積的培養基來觀察其對抑菌圈的影響。
　　1.試驗儀器及材料
　　試驗儀器：二級生物安全柜，生化培養箱，高壓滅菌鍋，恒溫水平搖床，移液槍。
　　標準菌株：ATCC6538金黃色葡萄球菌，8099大腸桿菌。
　　試樣：1.5 cm×1.5 cm規格，滅菌處理。
　　平板計數瓊脂，PBS緩沖液。
　　2.試驗方法
　　（1）接種液準備：按照標準規定，用PBS緩沖液稀釋細菌懸液至1×106cfu/mL～5×106cfu/mL。
　　（2）培養基準備：分別用移液槍制備10 mL、15mL、20 mL、25 mL四個不同體積的培養基各6個（3個用于ATCC6538金黃色葡萄球菌，另3個用于8099大腸桿菌）。
　　（3）試樣接種：用無菌棉拭子蘸取接種菌液，在平皿的培養基表面均勻涂抹3次，每涂抹1次，平皿轉動60°，后將棉拭子繞平皿邊緣涂抹一周，蓋上蓋子，置室溫干燥5 min。
　　（4）貼試樣：將試樣平貼在培養基上，用無菌鑷子輕壓試樣，使其緊貼培養基表面。每個培養基貼一塊試樣于中間位置。
　　（5）培養：倒置平皿，放入生化培養箱中37℃培養16h～18 h。
　　（6）測量：測出每個平皿中的抑菌圈外沿總寬度及試樣總寬度，進而算出抑菌圈寬度，求出平均值。
　　從試驗結果可看出，不同體積的培養基對抑菌圈的影響還是比較大的。培養基體積為10 mL和15 mL時，抑菌圈相差不大，但當培養基增加到20 mL時，抑菌圈驟降，下降率超過20%。總體來說，隨著培養基體積的增加，厚度也增高，但抑菌圈卻反而變小。原因可能是體積增大，越多的抗菌劑滲透到了培養基底層，從而影響了表面的抑菌圈大小。
　　3.結論
　　由以上試驗可以看出掌控培養基的體積是準確測量抑菌圈的一個關鍵點。以15 mL為準，10mL~15mL都是合適的。培養基太少不能覆蓋平皿底部，多于15mL會使結果低于實際值而把不合格樣品誤判成合格品。因此，在試驗時，應準確量化培養基的量，可采用移液槍或量筒來定量，而不能光靠經驗和感覺來定量培養基體積。