進(jìn)行內(nèi)酰胺酶檢測(cè)前需了解檢測(cè)對(duì)象

　　內(nèi)酰胺酶檢測(cè)主要是針對(duì)治療感染性疾病藥物的檢測(cè)，這類藥物都具有抗菌活性部分--β-內(nèi)酰胺環(huán)，這種酶是耐藥細(xì)菌針對(duì)內(nèi)酰胺類抗生素分泌的的，可以與β-內(nèi)酰胺環(huán)結(jié)合，使β-內(nèi)酰胺環(huán)裂解而被破壞，失去抗菌活性。
 

　　內(nèi)酰胺酶檢測(cè)主要就是檢測(cè)內(nèi)酰胺酶是否具有活性，其常用的方法有頭孢菌素顯色、酸定量、碘測(cè)量方法，及頭孢菌素酶、β酰胺酶和P/C測(cè)定藥盒法。β內(nèi)酰胺酶破壞β內(nèi)酰胺抗生素的β內(nèi)酰胺環(huán)有兩種作用機(jī)制。
 

　　一、大多數(shù)常見(jiàn)的β內(nèi)酰胺酶有一個(gè)依賴絲氨酸發(fā)揮作用的機(jī)制，并且根據(jù)氨基酸序列組成分為三類(A，C和D)。通常它們的活性位點(diǎn)具有一個(gè)狹窄的縱形溝狀結(jié)構(gòu)，在溝的底部形成了一個(gè)空腔(氧陰離子袋)，這種疏松的構(gòu)造容易彎曲，便于結(jié)合底物。由于β內(nèi)酰胺環(huán)上的羰基碳在結(jié)合β內(nèi)酰胺酶活性部位的絲氨酸時(shí)發(fā)生了不可逆的反應(yīng)，結(jié)果使其成為開(kāi)環(huán)物，進(jìn)而重建了β內(nèi)酰胺酶。這類酶對(duì)青霉素、頭孢菌素、單內(nèi)酰環(huán)類抗生素都有活性。
 

　　二、是一類不大多見(jiàn)的β內(nèi)酰胺酶，被稱為金屬類β內(nèi)酰胺酶，或B類β內(nèi)酰胺酶。它們的特點(diǎn)是利用一個(gè)2價(jià)金屬離子，絕大多數(shù)為鋅離子，分別與組氨酸或半胱氨酸結(jié)合，或同時(shí)與二者結(jié)合，并與β內(nèi)酰胺類抗生素的羰基碳的酰胺鍵相互作用，使其不能發(fā)揮作用。這類酶主要對(duì)青霉素、頭孢菌素、碳青酶烯類抗生素發(fā)揮作用，但對(duì)單內(nèi)酰環(huán)類抗生素?zé)o效。